טכניקת בדיקת האימונוספיגה של אנזים מקושרים – באנגלית Enzyme-Linked Immuno Assay – או בדיקת ELISA היא בדיקה אימונולוגית המאפשרת זיהוי או בדיקה של מולקולות בדגימה ביולוגית. זה הומשג ופותח על ידי שני מדענים שבדים, פיטר פרלמן ואווה אנגוואל באוניברסיטת שטוקהולם ב-1971.

המולקולות שנבדקו בשיטת ELISA הן בדרך כלל חלבונים. וסוגי הדגימות כוללים חומרים ביולוגיים נוזליים - פלזמה, סרום, שתן, זיעה -, מדיית תרבית תאים או חלבון רקומביננטי - חלבון המיוצר על ידי תא שהחומר הגנטי שלו השתנה על ידי רקומבינציה גנטית - שטוהר לתמיסה.

בדיקת ELISA משמשת בעיקר באימונולוגיה כדי לזהות ו/או למדוד נוכחות של חלבונים, נוגדנים או אנטיגנים בדגימה. בדיקה סרולוגית זו מאתרת במיוחד את הנוגדנים המיוצרים על ידי הגוף בתגובה לזיהום ויראלי.

השימוש בנוגדנים לאבחון מחלות זיהומיות מייצג שיטה ספציפית ומהירה. טכניקת ELISA היא טכניקה אימונו-אנזימטית המאפשרת לדמיין, מתוך דגימה ביולוגית, את התגובות בין אנטיגן – גוף הנחשב כזר על ידי האורגניזם החי – לבין נוגדן באמצעות תגובת צבע המופקת על ידי סמן אנזים – בדרך כלל פוספטאז אלקליין ופרוקסידאז - מחוברים בעבר לנוגדן. תגובת הצבע מאשרת את זיהוי החיידק המבודד או נוכחות הנגיף הרצוי ועוצמת הצבע נותנת אינדיקציה לכמות האנטיגנים או הנוגדנים בדגימה הנתונה.

ישנם ארבעה סוגים עיקריים של בדיקת ELISA:

• ELISA ישיר, מאפשר לזהות או למדוד נוגדנים. הוא משתמש רק בנוגדן ראשוני;
• ELISA עקיף, הנפוצה ביותר, מאפשרת גם לזהות או לבחון נוגדנים. הוא משתמש בנוגדן משני המעניק לו רגישות טובה יותר מאשר ELISA ישיר;
• ELISA בתחרות, מאפשר מינון של אנטיגנים. מיוצר על ידי תחרות על קשרים, הוא אינו משתמש באנזים;
• אליסה "בכריך", מאפשר מינון של אנטיגנים. טכניקה זו משמשת בדרך כלל במחקר.

מבחן ELISA משמש עבור:

• למצוא ולמדוד נוגדנים בסרולוגיה לאבחון מחלות זיהומיות: וירולוגיה, פרזיטולוגיה, בקטריולוגיה וכו';
• מינון חלבונים בריכוזים נמוכים: מינונים ספציפיים של חלבוני פלזמה מסוימים (אימונוגלובולין E (IgE), פריטין, הורמוני חלבון וכו'), סמני גידול וכו';
• מינון מולקולות קטנות: הורמונים סטרואידים, הורמוני בלוטת התריס, תרופות...

בדיקת ELISA משמשת במיוחד לאבחון מחלות זיהומיות רבות:

מחלות מין (STD)

כולל הפטיטיס, עגבת, כלמידיה ו-HIV. מומלצת על ידי רשויות הבריאות, זוהי בדיקת הסקר העיקרית לאיידס: היא מראה נוכחות של נוגדנים נגד HIV והאנטיגן p24 שישה שבועות לאחר ההדבקה.

מחלות אזוריות או אנדמיות

קדחת צהובה, מחלת נגיף מרבורג (MVM), Ladengue, Lyme, Chikungunya, Rift Valley Fever, אבולה, קדחת לאסה וכו'.

הקוביד-19

כדי להתבצע יותר משבועיים עד 2 שבועות לאחר הופעת התסמינים, בדיקת ELISA מאפשרת לזהות, תוך פחות משעה, נוכחות של נוגדנים אנטי-SARS-CoV-3.

פתוגנים ויראליים הגורמים לזיהומים טרום לידתיים

טוקסופלזמה, אדמת, ציטומגלווירוס, הרפס סימפלקס למשל.

מקרים אחרים

אבל הוא מצא גם יישומים בזיהוי:

• הריונות;
• מחלות אוטואימוניות;
• אלרגנים למזון: הקביעה הכמותית של סך אימונוגלובולינים E (IgE) מסייעת בהערכה ובטיפול באלרגיות;
• הפרעות הורמונליות;
• סמני גידול;
• וירוסים צמחיים;
• ועוד רבים

כחלק מגילוי נוגדנים נגד SARS-CoV-2, מחקר פיילוט שבוצע באוגוסט 2020 על ידי המכון פסטר, ה-CNRS, Inserm ואוניברסיטת פריז מאשר את מהימנות בדיקת ה-ELISA: שתי בדיקות ה-ELISA נבדקו. חלבון ה-N כולו של SARS-CoV-2 (ELISA N) או התחום החוץ-תאי של ספייק הנגיף (S) כאנטיגנים מטרה. טכניקה זו תאפשר לזהות נוגדנים ביותר מ-90% מהמקרים, עם שיעור חיובי כוזב נמוך מאוד של 1%.

בדיקות אליסה, המבוצעות במעבדות ניתוח על פי מרשם רפואי, עולות בסביבות 10 אירו ומוחזרות ב-100% מקופת החולים.

מבוצעים במרכזי מידע, סקר ואבחון חינם (CeGIDD), הם יכולים להיות בחינם עבור HIV ו-SARS-CoV-2.